肿瘤标志物检测的影响因素有哪些

肿瘤标志物检测的影响因素有哪些

目前,已被发现的肿瘤标志物(TM)有100多种,这些TM检测结果可对患者产生直接影响。在实际工作中,影响TM检测的因素很多,涉及分析前、分析中和分析后各个环节。下面是为大家带来的肿瘤标志物检测的影响因素有哪些的知识,欢迎阅读。

一、分析前影响因素

1、临床诊疗措施对影响

前列腺按摩、前列腺穿刺、导尿和直肠镜检查后,血液中前列腺特异性抗原(PSA)和前列腺酸性磷酸酶(PAP)可升高。某些药物会影响TM浓度,如抗雄激素***前列腺癌时可抑制PSA产生;丝裂霉素、顺珀等抗肿瘤药可导致PSA假性升高;一些细胞毒药物(如5-氟尿嘧啶)***肿瘤时,可使癌胚抗原(CEA)暂时升高。

2、肝肾功能异常的影响

肝功能异常、胆道排泄不畅、胆汁淤滞等均可造成CEA、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转移酶(GGT)和细胞因子等浓度增高。肾功能不良时细胞角蛋白质19片段(CYFRA21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCC)和β2微球蛋白(β2-MG)可升高。

3、生物学因素的影响

随年龄的增长PSA升高;老年人CA199、CA153、CEA等可升高。部分妇女在月经期CA125和CA199可升高。在妊娠期甲胎蛋白(AFP)和CA125等明显升高。某些长期抽烟者中可见CEA升高。

4、标本采集和保存的影响

由于红细胞和血小板中也存在神经元特异性烯醇化酶(NSE),标本溶血可使血液中NSE浓度增高。通常血液标本采集后应及时离心,保存于4℃冰箱中,并在24h内测定;不能在24h内测定的血清应贮存于-20℃冰箱内;须长期贮存的标本应置;-70℃保存,且应防止反复冻融。酶类和激素类TM不稳定,易降解,应及时测定或分离血清低温保存。此外,试管内的促凝剂对某些TM有干扰;呼吸道分泌物、唾液和汗液等污染标本,可使SCC、CA199和CEA升高。

二、分析中影响因素

1、测定方法和试剂的影响

TM测定方法有放射免***测定法(RIA)、酶联免***测定法(ELISA)和化学发光免***测定法(CLIA)等。手工方法,由于加样、洗涤、温育、制作标准曲线等操作步骤多,则重复性较差,人为误差较大。自动化仪器测定,重复性好,人为误差小,但是不同厂家、不同试剂盒测定有差异,原因是使用的单克隆抗体针对抗原的位点不同所致。有时使用同一种抗体,也可能因抗原异质性或基质的影响而得到不同的结果。导致分析中误差的主要原因是缺乏测定的标准化,包括缺乏统一的抗原成分、校准品和参考方法等。因此,要尽量使用同一方法,同一仪器和同一厂家试剂盒进行测定。

2、“钩状效应”的影响

若待测样本中抗原浓度过高,会出现高浓度后带现象(“钩状效应”),此时免***反应被明显抑制,测定结果偏低,要消除此干扰,只有对样本进行适当稀释后重新测定。

3、交叉污染的影响

在测定高浓度标本时,交叉污染成为一个导致假阳性的潜在问题。特别是紧随在高浓度标本后一标本,若出现偏高结果,应复查有无交叉污染。

4、嗜异性抗体对检测结果的影响

大多数TM测定中常使用一对鼠单克隆抗体与肿瘤抗原反应,如患者因闪烁影像学检查或***时使用过鼠单克隆抗体,则体内会产生人抗鼠抗体(HAMA),血清中的HAMA可在"种鼠单克隆抗体间起“桥梁”作用,导致无抗原情况下,出现TM浓度增高的假象。对有动物密切接触史者要特别注意嗜异性抗体问题,以避免假阳性而带来医疗纠纷。

5、抗原和抗体反应对TM测定的影响

抗原抗体反应系指抗原与相应抗体间所发生的特异性结合反应,受抗原抗体的性质、活性、效价、反应比例及环境(如电解质,pH值,温度)等因素影响。

三、分析后影响因素

1、参考值范围

不同的标本类型如血液、尿液、胸腹水等,必须有不同的参考值。不同地区、人群、方法、试剂和设备应建立自己实验室的参考值范围。但目前临床使用的参考值大多为国外文献报道的数据,很少有国内自己的参考范围,对此应向临床说明,供临床诊断和分析疾病时参考。

2、TM基础测定值变化

每个人的TM水平是未知的,且波动较大。在监测患者***前、中、后各阶段TM含量的变化时,最好作TM含量变化的曲线***,并以***后的水平作为特殊的“参考水平”,这对判断疗效和监测复发有很大价值。

3、与临床的交流和沟通

由于TM测定对临床诊疗有特殊性,必须加强与临床的交流和沟通,当改变TM检测方法和试剂时,必须通知临床,以免影响结果的判断。

总之,影响TM检测的因素很多,要达到检测的标准化和规范化以及各实验室间结果的可比性,还有大量的工作要做。但是,全面了解和掌握的特点,合理科学使用TM,严格执行操作规程,避免分析前、分析中、分析后等不良因素对检测结果的影响,定将使TM检测在肿瘤的诊断与防治中发挥更重要的作用。

标本对结果的影响

1、前列腺穿刺、前列腺按摩、直肠镜检和导尿后,血液中PSA、PAP含量可升高;

2、胆汁淤滞、胆道排泄受阻、肝肾功能异常升高等,血液中CEA、GGT、ALP含量可升高;

3、某些抗肿瘤药物如,丝裂霉素、顺铂可使血液中PSA含量可升高;由于红细胞和血小板中存在着NSE,所以标本溶血或放置时间过长(且未分离血清保存),均可使NSE测定结果升高;

4、肿瘤细胞的坏死和坏死程度:肿瘤细胞坏死后,释放出TM,使血液中TM升高,坏死程度越大,血液中TM升高越明显。

5、操作中标本被汗液、唾液污染可使SCC测定结果升高;

6、不能使用盛有抗凝剂的采血管,因为某些抗凝剂可使TM测定结果偏高;

7、要考虑到TM在血液中的生物学半衰期不同如AFP:2~7天、PSA:2~3天、SCC、NSE、CYFRA21-1仅1天等。

肿瘤病人自身状况的因素

1、肿瘤的大小和肿瘤细胞的数目:肿瘤越大、肿瘤细胞的数目越多,血液中TM越高;

2、肿瘤细胞自身的分化程度:肿瘤细胞的分化程度越差,恶性程度越高,血液中TM越高,但确也有部分肝癌患者AFP不升高,可能此类癌肿肝细胞不分泌或分化程度接近正常所致。

3、肿瘤的分期不同:肿瘤越晚期,血液中TM越高;

4、肿瘤细胞表达和合成肿瘤标志物的程度:肿瘤细胞表达和合成的TM程度越高,血液中TM越高,反之,血液中TM较低;

5、肿瘤细胞的坏死和坏死程度:肿瘤细胞坏死后,释放出TM,使血液中TM升高,坏死程度越大,血液中TM升高越明显。

6、TM在体内的降解和排泄:若肝脏、肾脏功能差,排泄速度慢,则TM在体内明显升高;

7、假阳性和假阴性;有些疾病如炎性疾病,结缔组织病和生理变化如妊娠时,有些标志物的表达也升高,可导致假阳性;而有些肿瘤标志物较少或肿瘤细胞被封闭,抗原抗体形成免***复合物,血循环差等都可导致肿瘤标志物不能被检出,导致假阴性。

8、妇女月经和妊娠期血液中AFP含量明显升高,CA125、CA199也可升高,长期吸烟会使血液中CEA含量偏高;

9、非法表达与假基因转录:非法表达指有些基因在肿瘤组织中表达,在正常组织中不应该表达而有少量表达;假基因转录,指假基因转录为mRNA,一般情况下不翻译为蛋白质。在定性的检测mRNA和蛋白质时,这两种情况都可以影响检测的准确性和特异性,导致假阳性。

10、患者血液中有噬异性抗体存在,可导致TM假阳性结果,要将此抗体消除后再检测;

11、肿瘤病人的自身状况不同,所以注意病人基础测定值对于观察疗效、预报复发有非常重要的价值。

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